技術(shù)文章
Technical articles
摘要：生物通www.ebiotrade.com1月15日，來自澳大利亞墨爾本大學(xué)、華大基因等處的研究人員聯(lián)合在《自然遺傳學(xué)》(NatureGenetics)發(fā)表了題為“Whole-genomesequenceofSchistosomahaematobium”的研究論文，報(bào)告了對埃及血吸蟲(Schistosomahaematobium)全基因組測序的研究成果。索取：Millipore抑制劑技術(shù)手冊生物通www.ebiotrade.com生物通報(bào)道1月15日，來自澳大利亞墨爾本大...
摘要：生物通www.ebiotrade.com在近日召開的植物和動(dòng)物基因組大會(huì)上，孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們?nèi)绾卫肐onPGM測序儀對玉米石(又名白花景天)這種植物的基因組進(jìn)行測序。在干旱條件下，這種植物可從標(biāo)準(zhǔn)的C3光合作用轉(zhuǎn)換到景天酸代謝(CAM)。索取：IonPGM測序資料生物通www.ebiotrade.com生物通報(bào)道在近日召開的植物和動(dòng)物基因組大會(huì)上，孟山都基因組分析中心的研究人員ToddMichael介紹了他們?nèi)绾卫肐on...
過去用于檢測Tg自身抗體的方法有：沉淀試驗(yàn)、間接免疫熒光(11F)、血凝試驗(yàn)、ELISA和放射定量分析。目前常用IIF法和ELISA法。IIF法熒光圖形為在甲狀腺濾泡腔內(nèi)出現(xiàn)波浪狀著染。在甲狀腺炎患者中抗TPO抗體檢測方法的靈敏度稍遜于抗Tg抗體，但實(shí)際上兩者的檢出率不相上下。用高靈敏度方法檢測Tg，可能會(huì)降低與疾病相關(guān)的特異性。一些評估Tg自身抗體特異性的研究表明，甲狀腺功能正常的個(gè)體與自身免疫性甲狀腺炎免疫應(yīng)答之間存有一定的差別。正常人亦可產(chǎn)生能識別相同或具有交叉反應(yīng)性抗...
很多免疫學(xué)技術(shù)依賴于標(biāo)記抗體的使用。對抗體進(jìn)行標(biāo)記主要是用于抗原的定位分析，在某些情況下，也可以對混雜有大量其他分子的樣本中的抗原進(jìn)行定量檢測。由于抗體與其相應(yīng)抗原具有很高的親和力，因此帶有易識別標(biāo)記物的抗體可以定位分析抗原，并且是一種理想的快速價(jià)廉的定量測定方法。需要使用標(biāo)記抗體的三種方法，即免疫染色法、免疫印跡法和免疫分析。此三種方法均能定位復(fù)雜混合物中的抗原，而且通過適當(dāng)?shù)膶φ找材芏繙y定。就免疫染色法而言，其目的就是定位正常細(xì)胞環(huán)境中出現(xiàn)的抗原。在此背景下，所有抗原均...
1．如果使用經(jīng)免疫沉淀法得到的蛋白，按常規(guī)洗滌免疫復(fù)合物。盡可能*去除zui后的洗液。如果使用其他來源的蛋白，則將其轉(zhuǎn)入20mmol／L的磷酸鹽溶液中(pH7．0)，或直接在20／1l水中重懸蛋白。蛋白濃度應(yīng)低于lmg／m1。2．加入20u1．5％SDS和20mmol／LDTI。3．加熱至85C10min，仔細(xì)將上清液移入另一試管。4．加入10rd新鮮配制的0．2mmol／LN-乙基順了烯二酰亞胺(NEM)，12．5mg／m1的水溶液為飽和溶液)，使用前臨時(shí)配制。85℃溫育1...
所有的固定方案必須做到：①防止抗原丟失；②透化細(xì)胞以便使抗體進(jìn)入；③盡量使抗原保持能與抗體結(jié)合的狀態(tài)；④維持細(xì)胞正常結(jié)構(gòu)。常用的固定劑種類很多，固定劑的正確選擇取決于被研究抗原的性質(zhì)及所用抗體的特性。固定劑可分為兩大類：有機(jī)溶劑和交聯(lián)劑。有機(jī)溶劑如乙醇和丙酮能夠去除脂類物質(zhì)使細(xì)胞脫水，把蛋白質(zhì)沉淀在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上。交聯(lián)劑一般通過自由氨基基團(tuán)把生物分子橋連起來，形成一個(gè)相互連接的抗原網(wǎng)。兩種方法均使蛋白質(zhì)抗原部分變性。因此，在細(xì)胞染色中，能夠識別變性蛋白的抗體更加有用。在某些情況下...
1．主要內(nèi)容純化率為1000～10000倍。快速純化抗原，層析柱常可重復(fù)使用。可獲得純化的抗原。不能用于定量測定。純化效果取決于抗原的濃度和抗體的親和力需要適當(dāng)純化的抗體。2．操作步驟(1)將抗體結(jié)合到蛋白A或蛋白G微珠上。對于一般用途的層析柱，每毫升濕的微珠大約可以結(jié)合2mg單克隆抗體或親和純化的多克隆抗體。將抗體和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的勻漿，在總量為10ml的溶液中加入大約lml微珠，室溫孵育1h，輕輕搖動(dòng)混勻。(2)用10倍體積的0．2mol／L硼酸鈉(pH9...
標(biāo)記蛋白具有許多優(yōu)點(diǎn)。原則上，該方法為檢測各種細(xì)胞成分中感興趣的蛋白提供廠新的手段。①如果開放閱讀框已經(jīng)被克隆化，但是由于蛋白是新發(fā)現(xiàn)的，或者由于蛋白免疫原性較弱，目前尚沒有針對該蛋白產(chǎn)物的抗體時(shí)，此標(biāo)記技術(shù)具有重要的應(yīng)用價(jià)值。隨著基因組的研究，由基因工程進(jìn)入蛋白工程，標(biāo)記技術(shù)顯得越來越重要。②由于標(biāo)記物不是天然蛋白氨基酸序列的固有部分，與標(biāo)記物結(jié)合的試劑在進(jìn)行蛋白提純過程中，對蛋白功能產(chǎn)生影響的可能性較小。③只要具備適當(dāng)?shù)妮d體，標(biāo)記蛋白可在任何細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)；例如，相同的標(biāo)...
當(dāng)前位置：
